蛋白質測定儀操作方法粗談
來源: 本站 類別:實用技術 更新時間:2010-08-17 閱讀次
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蛋白質測定儀操作方法粗談
蛋白質測定儀是用於測定糧食、食品、乳製品、飲料、飼料、土壤、水等物質中氮或者蛋白質含量的儀器,因為所測出的物質不僅含有蛋白質,同時還含有遊離氨基酸、嘌呤、吡啶、尿素、硝酸鹽和氨等物質,因此該儀器又被稱為粗蛋白測定儀。
蛋白質測定儀包括兩個裝置:消化爐和蒸餾裝置,分別用來消化樣品以及蒸餾和滴定。浙江托普生產的蛋白質測定儀的消化爐有多種孔數選擇,如4孔、8孔、12孔和20孔,根據消化爐不同孔數,我們可以將定氮儀分為不同的型號。如KDN-04A、KDN-08C等。下麵我們具體介紹下蛋白質測定儀在測定蛋白質含量時的操作步驟。
消化:稱取經粉碎的樣品0.5克(視含氮量而定),放入已洗滌烘幹的消化管中,加催化劑5克左右和10ml左右硫酸(如果是固體樣品,最好在加濃硫酸前先加3ml左右的蒸餾水以濕潤樣品,以防止濃硫酸遇到強堿發生劇烈反應)。jiangxiaohuaguanfangruxiaohuajiadegegekongnei,ranhouzhiyuxiaohualushang,ranhoukaiqichouqisantongshangzilaishuilongtou,shichouqisantongchuyuxiqizhuangtai,jietongdianyuankaishixiaozhu。xiaohuaguanyoubutongdekongshuqubie,nikeyianzhaoyangpinshudeduoshaolaixuanze。meilianggexiaohualukonggongyongyigejinchushuikaiguan。
蒸餾:(1)打開電源,儀器自動進入加水狀態,待加水工作完成後會自動停止。(2)在zai左zuo邊bian托tuo盤pan放fang上shang空kong的de消xiao化hua管guan,右you邊bian放fang上shang空kong的de三san角jiao瓶ping,打da開kai水shui龍long頭tou開kai關guan。為wei排pai空kong管guan路lu內nei空kong氣qi,實shi驗yan前qian請qing先xian按an下xia加jia酸suan鍵jian,待dai液ye體ti流liu順shun暢chang後hou停ting止zhi加jia酸suan;jiajiantongyangcaozuo。anxiazhengliujian,yiqikaishijinruzhengliuzhuangtai,daizhengqizidongcongpensheguanzhongpenchubingwendinghou,guanbikaiguan。zaizuobiantuopanfangshangyixiaohualengquehaodeyangpin,youbiantuopanfangshang250ml三角瓶,並使管口碰到杯底。再打開電源,依次按加酸、加堿、蒸餾鍵對樣品進行蒸餾(加酸、加堿量設定自行)。蒸zheng餾liu完wan畢bi後hou,將jiang三san角jiao瓶ping下xia移yi,使shi接jie收shou管guan離li開kai液ye麵mian,用yong水shui衝chong洗xi出chu氣qi口kou,繼ji續xu蒸zheng餾liu半ban分fen鍾zhong後hou,取qu下xia三san角jiao瓶ping待dai滴di定ding用yong。第di二er個ge樣yang品pin同tong上shang方fang法fa。(3)關guan開kai關guan,關guan水shui龍long頭tou,取qu下xia消xiao化hua管guan,打da開kai側ce麵mian排pai水shui夾jia子zi,把ba連lian堿jian泵beng的de膠jiao管guan放fang入ru蒸zheng餾liu水shui容rong器qi內nei,打da開kai電dian源yuan開kai關guan用yong手shou按an加jia堿jian按an鍵jian抽chou蒸zheng餾liu水shui清qing洗xi堿jian泵beng,酸suan泵beng同tong樣yang清qing洗xi,最zui後hou關guan電dian結jie束shu。
滴定:用0.1 NHCL滴定接收瓶內的溶液,滴定至粉紅色時為止,記下消耗HCL的毫升數,按下列式子計算蛋白含量:
蛋白質%= 

式中:X―樣品中蛋白質的含量,%
V1―樣品消耗硫酸或鹽酸標準液的體積,ml;
V2―試劑空白消耗硫酸或鹽酸標準液的體積,ml;
N―硫酸或鹽酸標準溶液當量濃度;
0.014―1N硫酸或鹽酸標準溶液1ml相當於氮克數;
m―樣品的質量(體積),g(ml);
F―蛋白質係數,按16%計算乘以6.25即為蛋白質。
(空白測定:用0.1克糖代替樣品或不加樣品作空白測定)
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