如何簡化葉綠素含量測定步驟

葉綠素含量是反映植物特別是光合機構生理狀況的一個基本指標,植物生理研究中經常涉及葉綠素含量的測定。一般的測定方法都包括葉片稱重

、研磨、衝洗、過濾和定容(25 mL或更多)及稀釋等繁瑣步驟,既費時間,又費溶劑,不適於科學研究中大批量樣品的測定,特別是以葉片鮮重表示的葉綠素含量,不僅容易受葉片含水量變化的幹擾,給測定結果帶來偏差,而且也不便於同以單位葉麵積表示的光合速率聯係起來分析兩者的關係。目前已經有很多新的方法出現
，如葉綠素儀測定法
，和本文要講到的葉絲浸提法。其中葉綠素儀法比較簡單
，直接將便攜式葉綠素儀帶到田間，夾在葉片正反麵，然後按下測試鍵
，就可也得到SPAD值
，SPAD值代表的是葉片的葉綠素含量值。另外SPAD和氮元素含量也有一定的關係，可以指導施肥。正因為測出的值是SPAD值
，葉綠素儀又可以叫做SPAD502葉綠素儀。

葉絲浸提法包括取樣、浸提
、比色和計算。以前一般采用的研磨過濾方法提取葉綠素,不僅費時間,從稱重到定容結束,1個樣品至少需要10min,而且由於不可避免的損失,所得到的結果一般會低一些;而用本文中的葉絲浸提法,不算浸提的等待時間,從取樣
、切細到投入80%丙酮浸提的操作時間一般不超過1~2min,而且可以避免過濾造成的損失。從用兩種方法測定的結果可以看到,用葉絲浸提法得到的葉綠素提取液可以直接用於比色測定光密度,不需要過濾或離心。雖然在用葉片細絲的浸提液中含有少量浸出物的雜質,但由於其對比色波長的光沒有明顯的吸收,所suo以yi測ce定ding的de結jie果guo受shou到dao的de影ying響xiang並bing不bu明ming顯xian。另ling外wai，葉ye片pian水shui分fen含han量liang的de不bu同tong，也ye會hui造zao成cheng葉ye綠lv素su含han量liang的de不bu同tong，一yi般ban，含han水shui量liang高gao的de葉ye片pian，其qi葉ye綠lv素su含han量liang明ming顯xian降jiang低di，這zhe個ge我wo們men在zai具ju體ti操cao作zuo時shi是shi需xu要yao注zhu意yi的de。