玉米葉綠素含量的快速測定
來源: http://98fo.cn/ 類別:實用技術 更新時間:2011-02-24 閱讀次
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玉米葉綠素含量的快速測定
葉綠素是植物葉片光合作用的主要光合色素,必不可少。葉綠素含量的測定是實驗室的重要項目之一,如采用化學方法Arnon法,分光光度計法,葉綠素測量儀等,不一而足。迄今為止,在實際應用中,我們通常采用葉綠素檢測儀,因為其方便快捷,而且精確度高,方便攜帶。受到廣泛農業工作者、科研院所的青睞。
分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計(ji)法(fa)測(ce)定(ding)結(jie)果(guo)準(zhun)確(que)可(ke)靠(kao),但(dan)是(shi)在(zai)測(ce)定(ding)時(shi)需(xu)要(yao)損(sun)傷(shang)葉(ye)片(pian)和(he)組(zu)織(zhi),不(bu)利(li)於(yu)對(dui)植(zhi)株(zhu)的(de)係(xi)統(tong)研(yan)究(jiu)。葉(ye)色(se)值(zhi)反(fan)映(ying)了(le)植(zhi)物(wu)葉(ye)片(pian)的(de)綠(lv)色(se)程(cheng)度(du),與(yu)葉(ye)綠(lv)素(su)含(han)量(liang)存(cun)在(zai)一(yi)定(ding)的(de)相(xiang)關(guan)性(xing)。葉(ye)綠(lv)素(su)測(ce)量(liang)儀(yi)是(shi)一(yi)種(zhong)專(zhuan)門(men)用(yong)於(yu)測(ce)定(ding)植(zhi)物(wu)葉(ye)綠(lv)素(su)含(han)量(liang)的(de)儀(yi)器(qi),該(gai)儀(yi)器(qi)有(you)多(duo)家(jia)廠(chang)商(shang)生(sheng)產(chan)銷(xiao)售(shou),其(qi)中(zhong)以(yi)日(ri)本(ben)柯(ke)尼(ni)卡(ka)美(mei)能(neng)達(da)公(gong)司(si)的(de)SPAD-502最(zui)為(wei)高(gao)端(duan)和(he)暢(chang)銷(xiao)。托(tuo)普(pu)儀(yi)器(qi)作(zuo)為(wei)日(ri)本(ben)柯(ke)尼(ni)卡(ka)美(mei)能(neng)達(da)公(gong)司(si)的(de)特(te)約(yue)一(yi)級(ji)代(dai)理(li)商(shang),也(ye)提(ti)供(gong)葉(ye)綠(lv)素(su)測(ce)量(liang)儀(yi)的(de)銷(xiao)售(shou)工(gong)作(zuo)。葉(ye)綠(lv)素(su)測(ce)量(liang)儀(yi)的(de)測(ce)定(ding)原(yuan)理(li)是(shi):測量葉子在紅色區域和近紅外區域的吸收率。通過這兩部分區域的吸收率,來計算出一種SPAD值,它是用數字來表示目前和葉子中葉綠素含量相對應的參數。因為葉綠素在藍色區域(400―500nm)和紅色區域(600―700nm)範圍內吸收達到了峰值,但在近紅外區域卻沒有吸收。另外,葉綠素測量儀還具有反應氮元素含量的作用。
玉米葉綠素含量的測定有兩種方法。葉綠素計法:利用日本產的SPAD-502葉綠素含量測定儀於花期對玉米功能葉片中部進行活體測定。每個材料取3個葉片,最後求平均值。分光光度計法:將葉綠素計法測定完的葉片取回進行分光光度計法測定。用毛刷刷去表麵雜質,用水衝洗,擦幹,備用。每個葉片在中部用直徑9mm打孔器打孔,取6個圓形葉片,稱重後放於15mL試管,用10mL95%乙醇避光浸泡96h,浸泡過程中每天混勻2次,葉片完全變白後進行比色,於665、649、470nm波長測量光密度值,計算葉綠素含量,取3個葉片的平均值作為該材料的含量值。計算公式為:CA=13.95D665-6.88D649;CB=24.96D649-7.32D665;C其它=(1000D470-2.05CA-114.8CB)/245。
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