酶標儀的選擇、自檢和校準
一、酶標儀的選擇
麵mian對dui類lei型xing如ru此ci眾zhong多duo的de酶mei標biao儀yi,實shi驗yan室shi在zai選xuan擇ze時shi往wang往wang有you難nan以yi適shi從cong的de感gan覺jiao。一yi般ban來lai說shuo,用yong於yu酶mei免mian疫yi測ce定ding比bi色se的de酶mei標biao儀yi可ke分fen為wei普pu通tong酶mei標biao儀yi,多duo功gong能neng全quan自zi動dong酶mei標biao儀yi和he全quan自zi動dong酶mei免mian疫yi分fen析xi係xi統tong等deng,普pu通tong酶mei標biao儀yi的de功gong能neng基ji本ben上shang相xiang當dang於yu一yi個ge微wei孑jieL板比色計,而多功能全自動酶標儀除了有微孔板比色功能外,還有酶標動力學,紫外乃至凝集等多種檢測功能;全自動酶免疫分析係統則有試劑“開放”和“限定”之分,所謂試劑“開放”是指不同品牌的ELISA試劑均可用於該儀器,而試劑“限定”則必須使用儀器專用的酶免測定試劑。實驗室在選擇酶標儀時,一般應遵循這樣幾條原則:
1.根(gen)據(ju)工(gong)作(zuo)需(xu)要(yao)去(qu)選(xuan)擇(ze)。切(qie)忌(ji)刻(ke)意(yi)去(qu)求(qiu)功(gong)能(neng)多(duo),因(yin)為(wei)一(yi)則(ze)如(ru)果(guo)儀(yi)器(qi)功(gong)能(neng)過(guo)多(duo),易(yi)出(chu)故(gu)障(zhang),二(er)則(ze)有(you)些(xie)功(gong)能(neng)如(ru)酶(mei)標(biao)動(dong)力(li)學(xue)或(huo)凝(ning)集(ji)等(deng),可(ke)能(neng)根(gen)本(ben)就(jiu)用(yong)不(bu)上(shang);ruguonigouzhidemeibiaoyizhuyaoshiyongyudingxingceding,zebubiyaoqiuwanmeidedingliangsuoxuderuanjianxitong。zhiyuquanzidongmeimianyifenxixitongzeduigongzuoliangbijiaodadexuezhanhuodaxingyiyuanjiaoweishiyong,duiyurichanggongzuoliangbutaidadeshiyanshi,jiuwubiyao。
2.genjumeibiaoyidexingnengquxuanze。fanyingmeibiaoyixingnengdezhibiaozhuyaoyoucedingbochangfanwei,lvguangpianpeizhi,jiancesudu,xiguangdufanwei,xianxingfanwei,fenbianlv,zhunquedu,jingmidudeng。
3.根據自己實驗室的財力去選擇。酶標儀品種類型多,由於性能不一,價格自然也就相差較大,實驗室可根據自己的財力去選擇性能/價格比較為合適的酶標儀。
4.根(gen)據(ju)售(shou)後(hou)服(fu)務(wu)去(qu)選(xuan)擇(ze)。實(shi)驗(yan)室(shi)儀(yi)器(qi)買(mai)了(le)以(yi)後(hou),就(jiu)跟(gen)我(wo)們(men)家(jia)裏(li)使(shi)用(yong)的(de)家(jia)用(yong)電(dian)器(qi)一(yi)樣(yang),在(zai)使(shi)用(yong)過(guo)程(cheng)中(zhong)及(ji)使(shi)用(yong)一(yi)段(duan)時(shi)間(jian)之(zhi)後(hou),很(hen)可(ke)能(neng)就(jiu)會(hui)有(you)保(bao)修(xiu)或(huo)維(wei)修(xiu)方(fang)麵(mian)的(de)問(wen)題(ti),因(yin)此(ci)一(yi)定(ding)要(yao)選(xuan)擇(ze)售(shou)後(hou)服(fu)務(wu)好(hao)的(de)公(gong)司(si)的(de)酶(mei)標(biao)儀(yi)。
5.根gen據ju實shi驗yan室shi人ren員yuan的de外wai語yu水shui平ping去qu選xuan擇ze。進jin口kou酶mei標biao儀yi現xian有you不bu少shao已yi使shi用yong中zhong文wen人ren機ji對dui話hua,對dui於yu英ying語yu上shang有you困kun難nan的de實shi驗yan室shi,應ying盡jin可ke能neng選xuan用yong此ci類lei酶mei標biao儀yi。
確定了選擇原則以後,就是怎樣去選擇了。選擇的步驟首先是要獲取有關酶標儀的信息資料,一般有這樣幾條途徑:
①向已購不同酶標儀的多家實驗室同行谘詢訪問,獲取最直接的使用效果的信息;
②酶標儀銷售商的信息廣告及介紹;
③權威機構的儀器評估報告。
獲huo取qu了le盡jin可ke能neng多duo的de酶mei標biao儀yi信xin息xi資zi料liao後hou,就jiu是shi對dui不bu同tong類lei型xing的de酶mei標biao儀yi的de性xing能neng指zhi標biao進jin行xing比bi較jiao,選xuan擇ze較jiao為wei適shi合he本ben實shi驗yan室shi的de一yi種zhong或huo二er,三san種zhong再zai向xiang銷xiao售shou商shang作zuo進jin一yi步bu的de詳xiang細xi谘zi詢xun了le解jie,以yi決jue定ding選xuan擇ze哪na一yi種zhong進jin行xing自zi檢jian。
二、meibiaoyidezijianhexiaozhuncongshangshusuohuodemeibiaoyixingnengdeyouguanxinxiziliao,jibenshangkeyishuoshijianjiede,youlemubiaoyihou,ruguohaixianghuodeduimouyimeibiaoyideganxingrenshi,keyiduiqijinxingzijian,zhuyaoyouxiashujigefangmian。
(一)外觀
酶標儀上應有儀器名稱,型號,編號,生產廠家,出廠日期和電源電壓;各調節旋鈕,按鍵和開關均能正常工作,外表麵無明顯機械損傷;顯示文字應清楚完整。
(二)酶標儀的穩定性(漂移)
選用492nm波長,在吸光度o.0A處,測定標稱值為1.0A的光譜中性濾光片(測定操作按儀器說明進行),記錄儀器示值或均值,10min後再次記錄儀器示值或均值,前後兩次測定值之差不應超過±0.005A。
(三)吸光度測定的準確度
選用405,492和620 nm波長,以空氣為參比,分別測定標稱值為0.5和1.0A的光譜中性玻璃濾光片,用專用測試板代替酶標板,按儀器說明連續測定3次,按下式計算準確度:AA=1/3(A、+A。+A3)―A:(A:為標準值)。
(四)吸光度測定的重複性
波長選擇同(3),在酶標板第一排加注空白溶液,第二排加入濃度為200rig/ml的重鉻酸鉀溶液,重複測定5次。記錄每次測定的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值與各次對應孔吸光度值。按下式計算重複性:
(五)酶標儀的線性
選用540nm波長,將標稱值o.5,1.0A中性濾光片分別放入專用測試板樣本位置中,以空氣為參比,各重複測定3次;然後將以上兩片中性濾光片疊加後置於專用測試板的同一孔位中,重複測定3次。線性誤差:
式中A1為第一片中性濾光片吸光度均值,A:為第二片中性濾光片吸光度均值,A1,2為兩片中性濾光片疊加後的吸光度均值。
(六)測定速度的檢定 .
選用492nm波長,放人96孔酶標板進行測定,用秒表計測儀器打印出全部數據的時間。
酶標儀除了在選購時,應盡可能自檢外,在使用中也應定期檢定,以保證酶標儀測定的有效性。
附:200ttg/ml重鉻酸鉀溶液的配製
將重鉻酸鉀固體試劑放人稱量瓶中(去蓋)置於烘箱中,在105±5℃下烘2h後,置於幹燥器內冷卻30min,在分析天平上準確稱取o.2829g,置於100ml燒杯中,用o.05mol/L稀硫酸溶解後,移入500ml容量瓶中,以少量o.05mol/L稀硫酸洗燒杯3次,洗液並入容量瓶中,用0.05mol/L稀硫酸稀釋至刻度線,搖勻。http://98fo.cn



